轉化成乙醇酸的試驗法
有机化合物内的NH2基团,可因該化合物和亚硝酸一起温热而与OH基团交换。因此可从氨基醋酸来形成羟基醋酸(乙醇酸):
CH2NH2COOH+HNO2 → CH2OHCOOH+H2O+N2 (1)
乙醇酸如和濃硫酸緩和地加热,会引起分裂而形成甲醛:
CH2OHCOOH → CH2O+CO+H2O (2)
由于甲醛和濃硫酸及鉻变酸会产生紫色,如将反应(2)于有鉻变酸存在下进行,这个显色反应就会发生。所以如将甘氨酸轉化成乙醇酸,如反应(1)所示,就可利用甲醛-鉻变酸反应来作出檢定。
其它氨基酸类,对这試驗并无干扰,因为只有甘氨酸可被轉化成乙醇酸。
这里所述的試驗法,在有能产生甲醛的化合物,如六甲撑四胺及其盐类或次硫酸盐等存在时,都不适用。
操作手续 试验在微量試管中进行。試液一滴与1%亚硝酸钠溶液及浓盐酸各一滴混和。混合物在自由火焰上加热至沸片刻。在105~110°蒸发后,将残渣冷却,而用新配的試剂2~3滴处理。混合物放沸水浴中保持5~10分钟。如現紫色即示明有甘氨酸存在。
試剂:将鉻变酸在浓硫酸中的悬浮体缓和地加热并进行离心分离。其上层的清液可用作試剂。
鉴定限度:10微克 氨基醋酸
降解成甲醛的試驗法
α-氨基酸类如用碱金屬次卤酸盐处理,就会脫去羧基及氨基而形成醛类,其中所含碳原子的数目比原来氨基酸中少了一个。在甘氨酸(α-丙氨酸与酪氨酸也可被氯胺T降解成醛类,其中碳原子的数目比其原来的化合物也少了一个)的事例中,变成甲醛的降解是易用氯胺T来达到的。这个次氯酸盐衍生物的利用,具有减輕甲醛(可用铬变酸试驗法进行检定)发生氧化的优点。
下面所述的試驗,在氨基酸这一族中,对于甘氨酸是有特效性的。用铬变酸处理时能分裂出CH2O的化合物必不可存在,或在事前先予破坏。
操作手续 在一微量試管中,将0.5%氯胺T新配成的水溶液一滴加到試液一滴中,再将混合物放热水浴中温热3~5分钟。冷却后,加入浓硫酸5滴及极小量的固体铬变酸。紫色立即或在水浴中加热短时后出現,都示正反应。
鉴定限度:3微克 甘氨酸