葡聚糖凝胶G15
中文名称 葡聚糖凝胶G15
英文名称 Sephadex G15;
分子式 C17H26INO3
分子量 A.肽及球形蛋白质:3000~80000;B. 葡聚糖(线性分子):1000~50000
CAS号 11081-40-6
质检信息
质检项目 指标值
含量,% ≥98.0
干颗粒直径: 40~120um
PH: 2~13
床体积毫升/克干分子筛:10~12ml/g
基本信息
葡聚糖凝胶是一种白色珠粒或粉末,属亲水性凝胶。性稳定,不溶于水,弱酸和碱溶液,遇强酸能使糖苷键分解,含有大量的羟基,指的是由一定平均相对分子质量的葡聚糖(dextran) 和甘油基以醚桥形式相互交联而成,具有立体网状结构,应用面广的一类凝胶,不溶于溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
产品用途
葡聚糖凝胶利用分子筛作用,进行多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定。交联葡聚糖的商品名为Sephndex,不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。
生产方法
将葡聚糖,氢氧化钠溶解于蒸馏水中配置成葡聚糖碱液;称取适 量聚醋酸乙烯脂,在搅拌条件下溶解于环氧氯丙烷中,配置成聚醋酸乙烯脂环氧氯丙烷溶液;在搅拌的条件下,将葡聚糖碱液倒入聚醋酸乙烯脂环氧氯丙烷溶液中, 进行交联反应,反应产物依次洗涤后,再经烘干即可得产品.
使用方法
1.葡聚糖凝胶预处理:
在室温下,将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,或者用蒸馏水煮沸至少1小时直至充分溶胀,凝胶体积不再变化。
注:在溶胀前,加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降,沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多,需要重复多次漂洗将其除去,防止层析时阻塞凝胶柱,影响流速。
2.装柱:
将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层; 装柱要均匀,可在凝胶耐受的操作压下装柱,装好的凝胶柱可以检测柱效,检测过滤柱装填是否合格。
凝胶层析分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度:分级分离时,一般需要100cm左右长的层析柱,柱高与直径之比为20~100:1,柱高过高时,凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压,应当尽可能避免;分组分离(例如脱盐)时用短柱,柱高控制在40~50cm以下,柱高与直径的比约为5~10:1。
3.平衡:
上样前用平衡液平衡层析柱至少3~5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(例如流出液的pH值等于上柱的Buffer的PH值);
4.上样:
分级分离时上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。
样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去,样品的粘度不能过高,否则影响分离效果。
5.洗脱方法:
可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;
6.在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向清洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
7.保存
凝胶柱暂时不用,可将其回收,一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干,可加入0.02%叠氮化钠防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生长。
产品信息 [重量] 25g [颜色] 白色 危险性类别 [危险性类别] 非危险品