MUG培养基

中文名称：MUG培养基

英文名称：MUG Medium

货号：   HB5213

产品规格：250g

质检信息

质检项目        指标值

蛋白胨            10.0g

磷酸二氢钾      0.9g

磷酸氢二钠      6.2g

硫酸锰            0.0005g

亚硫酸钠         0.04g

去氧胆酸钠     1.0g

硫酸镁            0.1g

氯化钠            5.0g

氯化钙            0.05g

MUG               0.075g

硫酸锌            0.0005g

PH值              7.3±0.1

检验依据 中华人民共和国药典

保质期： 三年

产品用途

MUG培养基用作大肠杆菌测试。

用法

称取本品23.37克，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中， 分装试管， 每管5ml，115℃高压灭菌20分钟备用。

注:培养基中含少量硫酸镁、氯化钙，灭菌后可能出现微量沉淀。

检验原理

胨提供碳氮源；硫酸铵、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁、氯化钠和氯化钙提供各种离子可维持均衡的渗透压及利于目标菌的生长；磷酸二氢钾和磷酸氢二钠为缓冲剂；亚硫酸钠和去氧胆酸钠为选择性抑菌剂。

细菌的葡萄糖醛酸苷酶在碱性条件下，作用于4－甲基伞形酮-β-D 葡萄糖醛酸苷（4－Methylumbellifery－β－DGlucuronide简称MUG）的β糖醛酸苷键，使其水解，释放的4－甲基伞形酮在366nm 紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

MUG培养基中细菌的生长特征

 

MUG培养基的使用方法视频

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操作步骤：

1.取细菌的新鲜培养物，用接种环接种于生理盐水管中，振荡混匀。

2.按照10倍系列稀释法制备菌液，取接种量为10-100cfu的菌悬液，进行试验。

3. 用移液枪吸取100μL稀释好的菌液接种到MUG培养基管中，接种两个平行管，同时吸取100μL生理盐水接种到MUG培养基管中作为空白对照。

4. 相同的方法接种其他菌株，之后放置于30-35℃培养5-24小时。

结果观察：

发现接种大肠埃希氏菌和阴沟肠杆菌的试管变浑浊。而接种金黄色葡萄球菌的试管为澄清状态。

葡萄糖醛酸苷酶检测

在黑暗环境中，使用366nm紫外灯照射培养后的试管，发现接种两株大肠埃希氏菌的试管均产生蓝白色荧光，这是因为MUG的β-糖醛酸苷键被大肠埃希氏菌产生的葡萄糖醛酸苷酶水解，释放出4-甲基伞形酮，4-甲基伞形酮在紫外灯下可产生蓝白色荧光。

而接种阴沟肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养管无蓝白色荧光，说明这两株菌不能产生葡萄糖醛酸苷酶。

靛基质试验

向培养后的试管滴加Kovacs靛基质试剂2-3滴，立即观察结果，也可以放置室温5-10min观察结果。发现接种两株大肠埃希氏菌的试管均有红色环产生，这是因为蛋白胨中的色氨酸被大肠埃希氏菌产生的色氨酸酶分解，形成靛基质。靛基质与Kovacs靛基质试剂反应，形成红紫色醌式化合物，即红色环。

而阴沟肠杆菌和金黄色葡萄球菌培养管有黄色环，说明这两株菌均不含有色氨酸酶。

MUG培养基试验原理及试验结果：4-甲基伞形通葡糖苷酸(HUG) 培养基试验原理及试验结果：

一、用途及原理

  用于大肠杆菌的快速鉴定(mo试验及靛基质试验)。

  蛋白胨提供碳氮源;硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁、氯化钠和氯化钙提供各种离子可维持均衡的渗透压及利于目标菌的生长;磷酸二氢钾和磷酸氢_二钠为缓冲剂;亚硫酸钠和去氧胆酸钠为选择性抑菌剂,抑制革兰氏阳性菌的生长。葡萄糖醛酸苷酶在碱性条件下，作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Me thylumbellifery- β -D-Glucuroni de简称MUG)的B糖醛酸苷键，使其水解，释放的4-甲基伞形酮在36nm紫外灯下产生蓝白色荧光。

  注:少数大肠埃希氏菌MUG试验为阴性,少数非典型大肠埃希氏菌靛基质试验为阴性，有时需补充其他试验进行鉴定。

二、培养基配方(g/L)

蛋白胨	10.0
磷酸二氢钾	0.9
磷酸氢二钾	6.2
硫酸锰	0.005
亚硫酸钠	0.04
去氧胆酸钠	1.0
硫酸镁	0.1
氯化钠	5.0
氯化钙	0.05
MUG	0.075
硫酸锌	0.0005
PH	7.3±0.125℃

 

此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果

注:本培养基有少许沉淀。

三、操作步骤

1、称取本品23. 37g，加热搅拌溶解于 1000m1纯化水中， 分装试管，每管5ml, 115C高压灭菌20分钟,备用。

2、制备质控菌液。

3、把质控菌液加入试管中。

4、在30-35C培养5-24小时,先置于36m波长紫外灯下观察有无荧光,再滴加靛基质试剂观察有无玫红色环出现。

注:靛基质试剂为强酸性,滴入后会破坏水解生成的4-甲基伞形酮，导致在紫外灯下失去荧光，因此观察试验结果时，需先观察荧光，再加入试剂观察靛基质反应。

四、试验现象

接种以下质控菌株,在30-35C培养5- 24小时:

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	生长情况	其他特征
大肠埃希氏菌	CMCC(B)44102	>5000	+++	有荧光，靛基质阳性
大肠埃希氏菌	AT0C25922	>5000	+++	有荧光，靛基质阳性
金黄色葡萄球菌	CMCC(B)26003	>5000	-	/
阴沟肠杆菌	ATCC22955	>5000	+++	无荧光，靛基质阴性

备注:左为366nm紫外灯下拍摄，右为滴加靛基质试剂后拍摄;

a:大肠埃希氏菌CMCC(B)44102 b: 大肠埃希氏菌ATCC25922

c:阴沟肠杆菌

d:金黄色葡萄球菌

 

MUG培养基的微生物灵敏度试验

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养5-24小时。

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	生长情况	其它特征
天肠埃希氏菌	7CMCC(B)44102	10-100	+++	有荧光，靛基质阳性
金黄色葡萄球菌	CMCC(B)26003	10-100	-	/

产品信息
[重量]	100g
[颜色]	白色
危险性类别
[危险性类别]	非危险品