明胶生化管

中文名称：明胶生化管

中文别名：细菌微量生化鉴定管

英文名称：Bacterial trace biochemical identification tube

产品货号：GB066

质检信息

质检项目        指标值

含量                99.9 %

检验依据 中华人民共和国药典

规格：            250g

产品规格：  1ml×20支/盒

保质期：        一年

化学特性

明胶生化管又称细菌微量生化鉴定管，明胶为从骨胶原而来的一种蛋白质，可溶于热水，形成的溶液凝固点在20-30℃，低温时呈固态状不流动，超过30℃时呈液体状。某些细菌具有明胶酶，可将明胶水解为多肽、氨基酸后失去凝胶性质，低温下不再凝固。

产品用途

明胶生化管用作变形杆菌、铜绿假单胞菌的检测。

产品用法

方法：取可疑菌落穿刺接种在明胶培养基内，35℃培养24小时，取出后放2-8度冰箱10-30min，如果仍为液体，实验结果为阳性，否则为阴性。

原理：有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。

结果判断

不同细菌在明胶生化管上的生化反应现象

 

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明胶液化实验操作视频

观看视频请占击>>>明胶液化实验操作视频

操作步骤：

可使用温水、培养箱或用手捂热等方法将明胶生化管温热至大约30-40℃，培养基呈液体流动状，摆直立，打开生化管，可用接种针或接种环挑取待测菌落穿刺接种或加入50-100μL的约109CFU/mL的菌悬液，缠上封口膜，置于36℃或其他适宜的条件下进行培养。

结果观察：

将生化管放入冰箱冷藏中10-20min或采用其他方法将培养基冷却至10℃左右，倾斜生化管，观察培养基是否能凝固。若培养基凝固不流动，说明明胶未被分解液化，为阴性反应；若培养基不能凝固呈液体状，说明明胶已被水解，为阳性反应。

注意事项：

（1）明胶在培养箱中和室温较高时呈液态状，因此观察试验结果时，必须确保培养基已完全冷却。

（2）细菌液化明胶的时间存在差异，有些细菌可在18-24h液化，有些细菌需要3-7天甚至更长时间才能液化，当出现阴性结果时，应至少观察一周。

（3）明胶的凝固点在28℃左右，受运输过程的温度及震荡影响，有可能出现培养基在管壁凝固形成不规则状，此为正常现象，并非质量问题，使用前可用水浴或培养箱或其他方法温育，使培养基呈液体流动状，摆直立即可。

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明胶生化管微生物灵敏度试验

接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养72小时

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	参比或计数培养基	方法	质控结果	其它特征
铜绿假单胞菌	ATCC9027	>5000	/	定性	+	液化
大肠埃希氏菌	ATCC25922	>5000	/	定性	-	不液化
蜡样芽胞杆菌	ATCC11778	>5000	/	定性	+	液化

 

注意事项

明胶的凝固点在28℃左右，受运输过程的温度及震荡影响，有可能出现培养基在管壁凝固形成不规则状，此为正常现象，并非质量问题，使用前可用水浴或培养箱或其他方法温育，使培养基呈液体流动状，摆直立即可。

细菌微量生化鉴定管使用说明书

一、实验准备

安瓿瓶：从包装盒中取出安瓿瓶，朝易折点（瓶颈上方蓝点）反方向用力折开安瓿瓶；或用砂轮划一圈安瓿瓶瓶颈，然后用力折开安瓿瓶，插入安瓿瓶架中备用。如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。

试 管：从包装盒中取出试管，插入试管架中。如果染菌或变色，则不能使用，重新拿一支。

注：折开安瓿瓶时最好包裹纱布，以免划伤手指。

二、接种方法

直接接种：用接种针从平板上挑取已纯化分离的同一菌落接种于需要试验的试管（安瓿瓶）中；菌悬液法：取一内盛 2mL 无菌水试管，用接种针或接种环从平板上挑取已纯化 1~3 个菌落至无菌水中仔细研磨成 0.5 麦氏浊度的均一细菌悬液，滴加 50~100μL 菌悬液至试验的试管（安瓿瓶）中。

注：如内容物为直立半固体或斜面，则用接种针挑取菌落穿刺或“之”字形划线接种。

三、接种后置于 36±1℃培养或检测标准中所规定的条件培养。

注：1.部分生化反应结果判断请参考备注及附录说明；

2.特殊细菌需放置在适宜生长的条件下培养（如厌氧菌需置于厌氧环境下培养）；

3.培养时间超过 24h 的生化管，建议加盖或封口膜（厌氧环境不能密封）。

四、生化管反应结果列表

（请下载看PPT→）细菌微量生化鉴定管使用说明书

附 录 : 

生化反应 1：氨基酸脱羧酶（双水解酶）试验：此试验需同时接种氨基酸脱羧酶（双水解酶）试验管和对照管，接种后需覆盖约 300μL 无菌液体石蜡；培养结束后，若试验管紫色，对照管黄色，则为阳性反应；若试验管和对照管均为黄色，则为阴性反应；若对照管浑浊不变黄或不生长，则说明待检菌为氧化型细菌或产碱型细菌（不能在无氧条件下分解葡萄糖产酸），无法判断试验结果。

生化反应 2：葡萄糖酸盐试验：培养结束后，按体积比 1:1 向生化管中加入班氏试剂，混匀煮沸 10min，冷却后观察结果，若出现黄色或橙红色沉淀，则为阳性反应；若为蓝色或绿色，则为阴性反应。

生化反应 3：氧化/发酵试验：每株菌接种 2 支生化管，接种后一支加液体石蜡封口，另一支不封口，培养结束后，二者均变黄为发酵型细菌，不封口者变黄而封口者不变色为氧化型细菌；二者均不变黄者为产碱型细菌。

生化反应 4：硝酸盐还原试验：培养结束后，滴加硝酸盐还原试剂 A 液和 B 液各 2～3 滴，数秒后观察颜色变化，若变红，则为阳性反应；若不变色，继续加入少量锌粒或锌粉，如仍不变红，则也为阳性反应，如变红，则为阴性反应。

生化反应 5：甲基红试验（MR）：培养结束后，滴加甲基红试剂 2～3 滴，混匀后立即观察结果，如显红色则为阳性，如显黄色则为阴性反应。生化反应 6：V-P 试验：培养结束后滴加 V-P 试剂（A 液 6 滴，B 液 2 滴），混匀后继续培养 0.5~4h，4h 之内变红则为阳性，不变色或棕黄色为阴性。

生化反应 7：苯丙氨酸脱氨酶试验：培养结束后，滴加 2～3 滴苯丙氨酸指示剂（10%三氯化铁），摇晃后数秒观察试验结果，如出现变绿色反应，则为阳性；如不变色（黄色）则为阴性反应。

生化反应 8：明胶液化：培养结束后，将生化管置于 4℃左右的环境中约 30min，如内容物不凝固呈液态状，则为阳性反应，如内容物凝固不流动，则为阴性反应。部分细菌的明胶液化反应较慢，可能需延长培养 3~7 天，方可观察到阳性结果。

生化反应 9：靛基质试验（吲哚试验）：培养结束后，需滴加 Kovacs 试剂 2～3 滴，摇匀后数秒内观察结果，如出现玫红色环，则为阳性反应，如不变色（黄色环）则为阴性反应。

产品信息
[重量]	10ml
[颜色]	无色液体
危险性类别
[危险性类别]	非危险品