溶菌酶

中文名称    溶菌酶

中文同名    脆壁质酶，溶菌酶,鸡蛋白

英文名称    lysozyme from human neutrophils

化学式       C125H1961N40O36S2

分子量       2899.27

CAS编号   12650-88-3

质检信息

质检项目      指标值

含量，%       ≥40000U/mg

PSA：         1406.02000

LOGP：      14.96760

密度  1.725 g/cm3

沸点  400.5°C at 760 mmHg

熔点  185-187?°C(lit.)

闪点  210.1°C

折射率 -180 ° (C=1, H2O)

蒸气压 4.45E-08mmHg at 25°C

水溶性 18 g/100 mL (20 oC)

化学特性

溶菌酶,鸡蛋白用作白色或微白色冻干粉,溶于水，不溶于乙醚和丙酮。酸性介质中可稳定存在，碱性介质中易失活。

产品用途

1.溶菌酶,鸡蛋白用于生化研究，临床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癣、扁平疣等疾病的治疗。 

2.生化研究。是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢杆菌、黄色八叠球菌等革兰阳性菌。

3.要用于五官科多种粘膜炎症如副鼻窦炎、慢性鼻炎、急慢性咽喉炎、扁平苔癣、口腔溃疡、渗出性中耳炎，以及皮肤科如带状疱疹、扁平疣、水痘等，亦用于哮喘性气管炎、溃疡性结肠炎、腮腺炎等。本品与抗菌药物同用效果更好。

4.溶菌酶具有破坏细菌细胞壁结构的功能，用溶菌酶处理G+细菌可以在破坏细胞壁后得到原生质体，所以广泛用于生物技术中，成为基因工程、细胞工程中细胞融合操作必不可少的工具酶。

5.针对溶菌酶无毒、无害的特性，同时对G+细胞壁的分解作用，应用于水产品和肉类制品中，在保证食品原有营养成分不受损失的前提下，可以对水产品和肉类制品起到保鲜和防腐作用；利用溶菌酶与氯化钠和亚硝酸盐联合应用，可以延长肉制品的保质期，其防腐效果比单独使用时效果更好；试验用0.05%的溶菌酶与植酸聚合磷酸盐、甘氨酸等配合使用，作为防腐剂和保鲜剂可以对海产品和水产品延长储存期。

6.奶油蛋糕是容易腐败变质的食品之一，在糕点中加入溶菌酶，可防止微生物引起的腐败变质现象发生；将溶菌酶应用于食物的保鲜中，其效果也极为明显。同时根据溶菌酶无毒、无害且有保健作用，有抗感染和增强抗生素的效力，以及促进血液凝固及止血和组织再生作用，现在有人尝试在食品中作为添加剂增强食物的保健功效。

 

储藏措施

1.储存于阴凉、通风的库房。

2.应与氧化剂、食用化学品分开存放，切忌混储。

3.保持容器密封。

4.远离火种、热源，防止阳光直射。

5.库房必须安装避雷设备。

6.排风系统应设有导除静电的接地装置。

7.采用防爆型照明、通风设置。

8.禁止使用易产生火花的设备和工具。

9.储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料。

10.防止粉尘和气溶胶生成。

急救措施 

【食入】摄入不可能。但是，如果摄入，获得紧急医疗照顾。

【吸入】如果克服被曝光，将受害人转移到空气新鲜处。给予吸氧或人工呼吸。获得紧急医疗照顾。迅速采取行动是至关重要的。

【皮肤】立即脱去污染的衣着。彻底清洗皮肤，用温和的肥皂/水。W /温水冲洗15分钟。如果是粘的，首先使用无水清洁。寻求医疗照顾，如果不良影响或刺激。

【眼睛】眼睛接触的情况下，立即用清水冲洗20-30分钟。经常收回眼皮。获得紧急医疗照顾。

生产方法

一、以蛋清为原料，在pH6.5条件下用弱酸性阳离子交换树脂732吸附后，再用硫酸铵洗脱，经透析后冷冻干燥得产品。

二、本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种溶菌酶制剂，包括溶酶菌A试剂，所述溶酶菌A试剂中有效成分为溶菌酶提纯液与硅油在高速搅拌下形成的溶酶菌-壳聚糖-硅油。

作为优选，还包括以下组分，以下组分按照重量计：

作为优选，所述溶酶菌-壳聚糖-硅油的制备方法主要包括以下步骤：

步骤1，蛋液分离：去除蛋黄，去除杂质；

步骤2，预备液制备，将二氧化硅作为制孔剂，混入高分子壳聚糖中，制备得到壳聚糖多孔膜：将壳聚糖溶解在低浓度的乙酸溶液中形成壳聚糖-乙酸溶液，将壳聚糖-乙酸溶液逐滴添加至液体石蜡中，滴加过程中持续搅拌，滴加完毕后高速搅拌至乳化；将低浓度戊二醛溶液与碱性二氧化硅混合并逐滴滴加至混合溶液中，搅拌至完全混合后，离心过滤5-8min，去除上层清液，将下层淡黄色沉淀收集，多次洗涤得到纯净物后，冻干研磨成粉；

步骤3：将预备液体与步骤1中制备的蛋液在微酸性环境下混合，静置24-48h后，离心8-15分钟后去除上层清液取下层沉淀；

步骤4：将卤代硅烷与有机溶剂混合后逐滴滴加至步骤3中下层沉淀中，搅拌并升温至50-58℃，搅拌10-20h后，减压蒸馏/减压干燥得到高浓度溶酶菌-壳聚糖-硅油复合物质；

步骤5：多次洗涤后收集。

作为优选，所述步骤3中微酸环境为偏磷酸钠水溶液，所述步骤4中有机溶剂为DMA。

作为优选，还包括辅助制剂A，所述辅助制剂A包括青刺果油提取物、玫瑰花油提取物、白兰花油提取物；所述溶菌酶A试剂与辅助制剂A混合形成净化精油。

作为优选，还包括辅助制剂B，所述辅助制剂B包括葛根提取物、大豆异黄酮提取物、植物胎盘液；所述辅助制剂B与溶菌酶A制剂混合形成净化精华。

作为优选，还包括辅助制剂C，所述辅助制剂C包括蜂胶提取物、薄荷脑、尿囊素；所述辅助制剂C和溶菌酶A制剂混合形成净化霜。

作为优选，将所述净化精油、净化净化或净化霜均匀涂抹在身体淋巴系统所在位置后配合按摩手法按摩直至吸收。

制备方法

溶菌酶是采用生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶，安全绿色的添加剂，无抗药性。

该酶广泛存在于人体多种组织中，鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个氨基酸残基构成的单一肽链。它富含碱性氨基酸，有4对二硫键维持酶构型，是一种碱性蛋白质，其N端为赖氨酸，C端为亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢杆菌、黄色八叠球菌等革兰阳性菌。溶菌酶在等电点以下较广泛的pH值范围内，分子带正电荷，可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上，洗脱后盐析，可得溶菌酶沉淀，再进行精制可得成品。蛋清吸附↓724树脂洗涤↓缓冲液洗脱↓硫酸铵溶液盐析透析去碱性蛋白↓NaOH冻干溶菌酶冻干粉沉淀干燥溶菌酶在5～10℃下，将新鲜蛋清540kg加入到已处理好的80kg 724树脂中，搅拌吸附6h，在0～5℃静置过夜。倾出上层蛋清，树脂离心甩干，用蒸馏水反复洗去黏附的卵蛋白，然后将树脂装入柱内，用0?15mol/L、pH=6?5磷酸缓冲溶液约150L洗涤树脂，再用约600L的10%硫酸铵溶液洗脱，收集洗脱液。洗脱液中加硫酸铵，使最终含硫酸铵量为40%，有白色沉淀生成，冷处放置过夜。虹吸上层清液，沉淀吸滤抽干，再用1倍蒸馏水溶解沉淀呈稀糊状，然后装入透析袋，在约5℃的条件下，对蒸馏水透析24h左右，中间换水2～3次。离心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液与离心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氢氧化钠溶液，同时不断搅拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉淀，即离心除去。然后用3mol/L盐酸调pH=5?0，冷冻干燥，即得白色片状溶菌酶。也可将离心液用3mol/L盐酸调pH=3?5，在搅拌下缓慢加入5%的固体氯化钠，在约5℃的温度下静置48h，离心，沉淀用0℃丙酮洗涤，干燥，即得溶菌酶。

作用机理

溶菌酶对革兰氏阳性菌、好气性孢子形成菌、枯草杆菌、耐辐射微球菌均有良好的分解作用,对大肠杆菌、普通变球菌和副溶血性弧菌等革兰氏阴性菌也有一定程度的溶解作用。溶菌酶具有分解细菌细胞壁中肽聚糖的特殊作用。细菌的细胞壁由胞壁质组成,胞壁质是由Ｎ-乙酰氨基葡萄糖及Ｎ-乙酰胞壁酸交替组成的多聚物,胞壁酸残基上可以连接多肽,称为肽聚糖。多糖以直链形式存在,彼此邻近的多糖链之间可以通过肽链部分相互连接,从而形成三维结构。酶的活性中心是天门冬氨酸和谷氨酸,溶菌酶通过其肽键中第35位的谷氨酸和第52位的天门冬氨酸构成的活性部位水解破坏组成微生物细胞壁肽聚糖分子的Ｎ-乙酰胞壁酸(NAM)与Ｎ-乙酰葡萄糖氨(NAG)之间的β-1,4糖苷键,使细胞因渗透压不平衡引起破裂,从而导致菌体细胞壁溶解而起到杀死细菌(尤其是球菌)的目的。

概述

溶菌酶(LZM)，N-乙酰胞壁胺聚糖水解酶，一种水解细胞壁肽聚糖，能使一些细菌溶解的碱性蛋白酶。由129个氨基酸残基组成，有4对链间双硫键形成稳定的分子构型。含有多种氨基酸，特别是含有大量的精氨酸、赖氨酸和亮氨酸。存在于唾液、眼泪、汗液、乳汁、肠分泌物、蛋清和脏器组织液中，在吞噬细胞的溶酶体中亦大量存在。它能使革兰阳性菌细胞壁的肽聚糖中乙酰葡糖胺和乙酰胞壁酸之间的1，4-β-糖苷键断裂，使细胞壁形成很多空洞，导致菌体溶解死亡。革兰阴性菌在细胞壁肽聚糖外面有一层脂多糖和脂蛋白，因不易受溶菌酶作用。但溶菌酶能促进和协助抗体——补体的溶菌作用，从而增强其杀菌作用。在吞噬细胞的溶酶体中含有丰富的溶菌酶，是吞噬细胞在发挥吞噬作用时的一种有力武器。此外，大多数凝固酶阳性和若干凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌也会产生一种与溶菌酶类似的胞外酶，称作内-β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶(EC 3.4.99.17)，它可水解肽聚糖分子中的葡糖胺酰-(1→4)-β-键。

优点

1．溶菌酶是很稳定的蛋白质，有较强的抗热性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的最耐热的酶；

2．溶菌酶不会因为有机溶剂的处理而失活，当转移到水溶液中时，溶菌酶的活力可全部恢复；

3．溶菌酶可被冷冻或干燥处理，且活力稳定；

4．溶菌酶适宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品防腐；

5．溶菌酶生产成本较低；

6．溶菌酶的抗菌谱较广，不仅局限于G- 菌，对部分G+菌也有抑制效果；

7．溶菌酶作为防腐剂安全性高。溶菌酶是一种天然蛋白质，1992年FAO/WTO 的食品添加剂协会已经认定溶菌酶在食品中应用是安全的。

副作用

偶有较轻的过敏反应。氯化溶菌酶医疗效果更广，有浓痰分散、出血抑制、组织修复、消炎镇痛、抗过滤性病毒等作用，因而用氯化溶菌酶的制药有消炎消痔、治感冒、皮肤病及眼、鼻、喉等用药.

产品信息
[颜色]	白色
[重量]	5g
危险性类别
[危险性类别]	非危险品