固定化酶米氏动力学常数的变化和酶的可储存性
化学先生 / 2019-08-03
1：米氏动力学常数的变化
在定量地评价固定化酶活性时，需要测定反应的米氏动力学(MichaeisMeren Eneaes equaron)常数，并和游离酶进行比较，从而确定固定化对酶催化反应速率的影响。一般情况下， 参与酶促反应的分于往往除酶和底物以外，还可以包括辅酶，抑制剂和活化剂等，但和酶结合进行反应主要是底物分子。因此，研究酶催化反应动力学，首先要从理论上阐明反应速率与底物浓度之间的关系。米氏动力学方程可以下式表示：
υ=υmax[S]/Km＋[S]
式中,υ为反应速事。υmax为最大反应速事: [S]为应物浓度。Km为米氏常数。
从米氏动力学方程可推导出米氏常数的一般含义，Km为 υ=1/2υmax,即反应速车等于最大道手1/2时的定物浓度。
酶固定于电中性很体后，表现米氏常数往往出游高酶的米氏常数高，而最大反应速事变小:而当底物与具有带相反电荷的载体结合后，表现米氏常数往往减小，这对固定化酶实际应用是有利的。此外，米氏动力学常数的变化还受客液中离子强度的影响，但在高离子强度下，酶的动力学常数几乎不变。
此外。根据米氏动力学的直线表达式，用1 υ/对1/[S]作图。也可以定量描述酶面定化以后，扩散效应对米氏动力学常数的影响(图8-5)。对于游离酶，1/ υ对I[S]作因为一直线，Km=6.2×10的负6次方mol/L；而对于固定化酶，由于受传质的扩放改应影响，则变为一条曲线。Km =3.3×10负5次方mol/L。
2：酶的可储存性
酶的可储存性对于酶的应用十分重要，酶在连续反应时的稳定性，是决定调定化酶能否在工业上应用的重要因素之一。据报道，有些固定化酶，经过储存，可以提高活性，有的则会使酶活性下降。有的酶可储存数月，活性不降，有的酶短期储存，活性就很快下降。用无机载体制备的固定化酶，比用有机载体制备的储存性能要好，而在无机载体固定化法中，又以偶氮基团连接的方法最好。但用有机载体制备固定化酶，其储存性能也有相当稳定的。
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