用对-羟基联苯和硫酸检测乳酸的試驗法
乳酸和濃硫酸一起温和地温热,就会分解成乙醛和甲酸;甲酸立即分裂:
CH3CH(OH)COOH → CH3CHO+HCOOH(→ H2O+CO)
乙醛和对-羟基联苯(Ⅰ)反应,可能由于在OH基团的邻部位上发生縮合,而形成二-(对-羟基联苯基)乙烷(Ⅱ):
在硫酸溶液中,(Ⅱ)会缓缓地氧化成未知結构的紫色产物。所以現在的试验法和利用2,7-二羟萘檢定乙醇酸相似,也牵涉到醛-酚反应,其中浓硫酸作用为縮合剂与氧化剂。事实上,介(乙)醛(四聚乙醛)、仲(乙)醛(三聚乙醛)、丁間醇醛及丙醛和对-羟基联苯与硫酸反应,都和乙醛类似,会产生深紫色产物。对-羟基联苯和甲醛成蓝-绿色,和丁醛成紅色,和庚醛成橙色。所以α-羟基丁酸和丙酮酸,都发生与乳酸同样的显色反应。
操作手续 試液一滴和浓硫酸1毫升放入一干試管中,置于水浴内,在85°加热2分钟。放在自来水龙头下冷却至28°后,加入固体对-羟基联苯一撮,再将混合物搅拌数次,放置10至30分钟,将会逐渐出现紫色。过了一些时其色加深。
鉴定限度:1.5微克 乳酸
用邻-羟基联苯和硫酸检测乳酸的試驗法
乳酸和濃硫酸一起加热所形成的乙醛,也可由其和邻-羟基联苯所发生的蓝色萤光来作出检定。甲醛、介(乙)醛、仲(乙)醛、及其次醛系高級同系物的性行,都类似乙醛。丙酮酸不发生干扰。萤光反应的化学根据尚未知道。
操作手续 試液一滴与結晶邻-羟基联苯一粒及浓硫酸0.5~1毫升在一試管中混和,置水溶中,在85℃加热2分钟。然后将試管对着黑紙檢视其蓝色螢光。
鉴定限度:1微克 乳酸
用間-萘二酚和硫酸检测甘油酸的試驗法
甘油酸(Ⅰ)的水溶液和含少許溶解間-萘二酚(Ⅱ)的濃硫酸共热,呈現强度的蓝色。
这个显色反应的化学原理尙未明了,可能視同乙醇酸及乳酸的醛-酚反应。其酯类的性行与单体醇酸相似。
乙醇酸及甘氨酸在这个反应中产生棕色;乳酸、α-羟基丁酸、β-羟基丁酸、赤酮酸(三羟基丁酸)、葡糖酸、乙醛酸、丙酮酸、乙酰丙酸、苹果酸、糖质酸、柠檬酸、中草酸及二羟基酒石酸在試驗条件下都无反应。丙醇二酸及奎尼酸产生绿色;葡糖醛酸产生黄的颜色与绿色的螢光;酒石酸绿到藍绿色;苹果酸黃的颜色与藍色的螢光。
操作手续 試液一滴与試剂溶液0.75毫升混和,并在90℃水浴中加热30至50分钟,将有蓝色出現;蓝色的深浅,视甘油酸存在量而定。
试剂:間-萘二酚0.01克溶于96%硫酸100毫升中。
鉴定限度:10微克 甘油酸