什么是酶的固定化
化学先生 / 2019-08-03
酶的固定化(enzyme immobilization)是指采用有机或无机固体材料作为载体(carrier, support), 将酶包埋起来或束缚、限制于载体的表面和微孔中,使其仍具有催化活性,并可回收及重复使用的酶化学方法与技术。不使用固体材料作为载体,通过酶分子之间的相互交联形成聚集体,也可将酶固定化,称为无载体酶固定化。20世纪90年代初报道的交联酶晶体(cross-linked enzyme crystals, CLEC)就属于无载体固定化酶。如果按照存在状态来进行分类,酶大致可分为天然酶和化学修饰酶,从生物体内直接分离的酶称为天然酶,固定化酶应属于化学修饰酶。在化学修饰酶中,除固定化酶外,还包括经过化学修饰的水溶性酶或应用分子生物学技术构建的基因重组酶等。
酶的固定化研究始于20世纪60年代中期,从70年代初开始酶的固定化技术研究发展很快,至80年代初,每年约发表1000篇以上的文献和近200篇专利,所报道的固定化方法达100种以上日。80年代中期以后,酶和细胞固定化研究的发展速度开始减慢,从而有人认为,对酶的固定化技术应予以重新评价,理由是尽管已经做了大量研究工作,但工业中实际应用的案例尚少。经过近20年的研究,真正能获得规模应用的固定化酶,还仅局限于葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶和青霉素酰化酶等为数不多的几个酶种。尽管如此,随着生物、信息和纳米技术的发展,以及对环境保护意识的增强,人们根据传统酶固定化技术存在的问题,不断探索改进、完善和发展新的酶固定化方法。作为生物、化学、材料、能源和环境等多学科的交叉点之一,酶的固定化研究仍不失为一个活跃的研究领城。
酶是一类具有催化功能的蛋白质,和化学催化剂相比具有反应速率快(约快106~1012倍),化学、立体和分子部位选择性好,反应条件温和,底物专- .性强,可在水溶液和中性pH下操作等优点,同时酶本身可以被微生物降解,符合绿色化学的要求。已在食品、医药、轻工和农业等许多领域得到广泛的应用,但和多相催化过程相比,酶在能源和化工中的应用还存在如下问题。
①酶一且从细胞中分离出来,其活性迅速下降,并且在实际应用中对外界因素非常敏感,容易因反应条件的变化和杂质的毒化作用而失活。
②酶的分离和纯化手续繁杂,大规模制备和应用成本较高。
③酶是溶于水的,在水溶液中进行反应,会导致酶和底物、产物从水中分离的困难,不利于循环使用。
④由于反应产物是酶的排泄物,对酶催化反应有抑制作用,限制了产物浓度的提高,因此生产强度低。
酶的固定化技术就是为了克服上述缺点,使酶催化反应能像化学催化剂一样在多相反应过程中稳定操作,并易于回收和反复使用而发展起来的一项酶化学与酶工程技术。