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核外电子云密度与化学键的磁各向异...
核的屏蔽效应来源于外磁场作用下的电子环流运动,核周围电子云密度越大对核产生的屏蔽效应越强,因此,与氢核相连的原子或基团电负性的强弱,直接影响电子云密度的大小。例如,卤代甲烷的化学位移随取代基电负性的增强而增大。
固定化酶最佳反应条件的变化
酶催化反应一般均在常温、常压、中性pH的水溶液中进行。固定化后,酶催化反应的最佳温度有时会发生变化,但在很多情况下也可能不发生变化。固定化酶最佳反应温度的变化,可能和反应活化能提高有关。在一般情况下,活化能高的催化反应,必须在较高反应温度下进行,才能得到比较好的转化率和选择性。
固定化酶的稳定性
稳定性是指固定化酶能否长期稳定操作和反复回收使用。由于不同催化反应体系的操作条件不尽相同,准确地测定和比较不同固定化酶的稳定性还有一定困难。
固定化酶的催化活性
在水溶液中游离酶分子与底物同处于液相,外部环境儿乎相同,而酶被固定化以后,则处于载体的各向异性微环境中。由于载体物理化学性质对酶与底物的作用和影响,从而可能引起酶的性质发生变化。和游离酶比较,固定化酶性质的改变,主要是由于酶处于载体的微环境中,会引起活性中心的氨基酸残基、高级结构和电荷状态等发生变化。而载体对固定化酶性质的影响,则主要表现在固定化酶周围,会产生立体和扩散效应,影响反应中酶和底物分子的接触。根据大量的实验观察证明,可归纳为空间效应、分隔效应和扩散效应。
酶的固定化方法一一交联法和包埋法
交联法是 采用双功能团试剂或多功能团试剂进行酶分子之间的交联,使酶分子和双功能团试剂或多功能团试剂之间形成共价键,得到三维的交联网状结构。除了酶分子之间发生交联外,还存在一定的分子内交联,根据使用条件和添加材料的不同,可制备不同物理性质的固定化酶。常用交联剂有戊二醛、双重氮联苯胺-2,2-二磺酸等。此法的优点是酶之间连接牢固,具有良好的稳定性及重复使用性,缺点是有时难以很好地控制反应条件,反应剧烈时,常常引起酶蛋白的高级结构发生变化,并导致活性中心受到破坏,从而难于保证每次都能制得高活力的样品。
酶的固定化方法一一表面担载法
表面担载法是通过物理或化学过程,将酶担载到非水溶性载体上的方法。它在固定化酶的制备中是使用最早的方法,有关这方面的报道也最多。用这种方法制备固定化酶时,必须按酶的种类和性质,选择合适的载体和固载方法。因为所选用的载体种类和固载方法对酶的担载量和反应性能影响很大。
什么是酶的固定化
酶的固定化(enzyme immobilization)是指采用有机或无机固体材料作为载体(carrier, support), 将酶包埋起来或束缚、限制于载体的表面和微孔中,使其仍具有催化活性,并可回收及重复使用的酶化学方法与技术。不使用固体材料作为载体,通过酶分子之间的相互交联形成聚集体,也可将酶固定化,称为无载体酶固定化。20世纪90年代初报道的交联酶晶体(cross-linked enzyme crystals, CLEC)就属于无载体固定化酶。如果按照存在状态来进行分类,酶大致可分为天然
脂肪酶催化反应有机溶剂和载体的影...
有机溶剂本身的性质对酶的主要水分子层有很大影响,非极性亲油型有机溶剂,如脂肪烃类溶剂不易夺取酶分子周围的必需水,对酶活性影响小,适于酶催化反应;强极性有机溶剂可溶解大量水,有夺走必需水的趋势,导致酶失活。
自旋核在磁场中的共振
核磁矩在磁场中有2I+1个不同的能量状态。根据电磁理论,在磁场H0中,放入一个磁矩为μ的小磁铁,则它们的相互作用能为:E=-μH0cosθ。式中:θ为μ与H0间的夹角。对于空间取向量子化的核磁矩,同样也用上式表示原子核处在磁场中的能量。
核磁共振波谱法及原子核的自旋
核磁共振波谱缩写为nmr或NMR,它是分子吸收波谱的另一种形式,在外磁场作用下,用波长10~100m的无线电频率区域的电磁波照射分子,可引起分子中某种核的能级跃迁,使原子核从低能态跃迁到高能态,此即核磁共振,且在某些特定的磁场强度处产生强弱不同的吸收信号。
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