根据光吸收定律，波长和强度一定的入射光通过光程长度固定的溶液时，吸光度与吸光物质的浓度成正比。通常在吸收光度法中，需要绘制标准曲线(工作曲线)，即固定液层厚度、入射光强度和波长，测定一系列不同浓度标准溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标作图，可得到一条通过原点的直线，该直线称为标准工作曲线。在相同条件下测得试液的吸光度，从工作曲线上可查得试液的浓度。但在实际工作中，特别是在溶液浓度较高时，常会出现标准工作曲线不成直线的现象，如图11-5所示。这种现象称为偏离Beer定律。若所测试液浓度在标准曲线弯曲部分，则测得的浓度必将有较大的误差。