发出氨的試驗法
       尿素酶可在室温下，使脲迅速而完全地水解为氨及二氧化碳，因此尿素酶可在试验专用仪器内，将試液一滴与10％脲的溶液一滴进行混和而作出檢定。仪器上的漏斗塞子，用一片曾經锰-銀試剂溶液浸渗过的滤紙盖住。如有尿素酶存在，在十分钟或不到十分钟，即有氨释出，使滤紙变成黑色。
       另一可替代的操作手续，系将待試尿素酶的溶液一滴，放在滴試板的凹处，然后加入10％脲溶液一滴。5～10分钟后，加入奈斯勒氏溶液一滴以驗証氨的产生。
       应注意到，小量的某些重金屬离子（Hg⁺²、Ag⁺）及Cu⁺²，会削弱相对大量尿素酶的活性，或大大地延长反应时間。

使絡合結合縮二脲发生水解分裂的試驗法
       尿素酶可以加速縮二脲的水解分裂：

NH(CONH₂)₂+H₂O → 2CO₂+3NH₃          (1)

尿素酶的一个试验法，即是根据于这一熟知的事实。这个水解作用，可用絡合碱-縮二脲鎳溶液的分解来說明。
       当縮二脲和鎳离子加碱金屬氢氧化物发生反应时，所产生的黄色溶液，在加入二甲基乙肟时，并不产生紅色沉淀。这个鎳灵敏试验法的隐蔽作用，是由于反应（2）产生了酸式縮二脲的含鎳絡合阴离子之故。

反应式（2）的平衡，是側重于向右进行的，致使鎳离子的濃度，不足以和二甲基乙二肟发生反应。可是，如加入尿素酶，使碱式縮二脲受到皂化，如（1）所示，这样就可由于不衡（2）的恢复，而釋出碱式縮二脲及Ni⁺²离子，使后者的濃度被提到二甲基乙二肟反应可以发生的水平。
       下面尿素酶的試驗法即根据于鎳的这个解蔽作用；此法具有适用于碱性溶液的优点。大量的铵盐引起二甲基乙二肟絡鎳从平衡溶液中沉淀出来。朊类及一切能收納－OH离子的物质，都产生同样的效应。
       操作手续    将碱-鎳縮二脲試剂澄清溶液的液滴放在滴試板上毗邻凹处，并将待試物的中性或碱性溶液一滴加到凹处之一，另一凹处則加水一滴。让这混合物在室温下放置10～15分钟，然后将每一凹处都用1％二甲基乙二肟的酒精溶液一滴处理。如有尿素酶存在，那里就立即沉淀出紅色的二甲基乙二肟络鎳。空白試验的黄色仍维持原状，或发生趋向橙色的微弱变化。
       試剂：硫酸鎳1克溶于50毫升水中，并加入縮二脲1克。溶液温热，加入1N氢氧化鈉15毫升。滤去生成的Ni（OH）₂沉淀。长时間放置后，溶液变成混浊，过滤后仍可使用。