能量转移研究方法和荧光共振能量转移在生物学上的应用

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能量转移研究方法和荧光共振能量转移在生物学上的应用

化学先生 / 2019-08-29

1.能量转移研究方法

能量转移的实验研究方法有稳态光谱法(常用的有吸收光谱、荧光发射和偏振光请、线二色及圆二色谱等)和时间分辨光谱法(瞬态吸收和时间分辨荧光光谱)。能量转移的理论研究方法包括确定型方法、随机型方法。

2.荧光共振能量转移在生物学上的应用

荧光共振能量转移(FRET) (Fluorescence/ Forster resonance energy transfer) 是比较分子间距离与分子直径的有效工具，广泛用于研究各种涉及分子间距离变化的生物现象，测量前先将给体分子和受体分子标记到蛋白质，这样可以通过测量给体分子和受体分子能量传递效率的变化来定量测定两个发光基团之间的距离。FRET 在蛋白质空间构象、蛋白与蛋白间相互作用、核酸与蛋白间相互作用以及其他一些方面的研究中得到广泛应用。FRET的应用:

①可用于研究蛋白质以及蛋白复合体的结构和空间构象与布局。

②研究蛋白质的折叠，蛋白质折叠是一个非常繁杂的过程，因为它涉及到通过大量途径来将无数去折叠构象连接成为唯一的天然构象。在用实验方法来探索各个途径所占比例的漫长过程中，FRET已经能够测量自由状态下单分子蛋白折叠的表面自由能特征，这些数据用其他方法是难以得到的。

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