荧光寿命测定的应用

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荧光寿命测定的应用

化学先生 / 2019-08-28

荧光技术分为静态荧光技术和时间分辨荧光技术。静态荧光技术固然重要，但是静态技术给出的只是平均化结果，平均化过程丢掉了有关分子运动的动态信息。

例如在蛋白质或合成高分子研究中，不管实际荧光各向异性衰减多么复杂，静态荧光各向异性测定总是假定体系荧光各向异性衰减是单指数的，而实际上大多数大分子体系荧光各向异性衰减都是多指数衰减，这样就掩盖了实际体系的复杂性，丢掉了实际体系中荧光物种所处环境的差异性等信息。

通过研究大分子体系荧光各向异性的实际衰减曲线可以得到有关大分子构象和链段柔性大小的信息。同样荧光强度衰减曲线也包含着十分有用的信息。例如生物大分子和合成高分子在溶液中往往具有多种不同的构象，因此相应的荧光衰减应该表现为多指数衰减形式。

用时间分辨荧光各向异性研究供体和受体间的能量转移时，不仅可以得到能量转移效率，而且可以揭示受体在供体周围的分布形式。利用时间分辨荧光技术可以揭示荧光猝灭是自由扩散控制还是特异性结合控制。

实际上许多分子间或分子内的弱相互作用信息，特别是动态信息，只有通过时间分辨荧光技术才能得到。

例如表面活性剂类两性分子在溶液或界面上的组装，纳米材料在储存过程中的相互聚集，蛋白质或其他大分子在固液界面吸附过程中的构象调整，大分子与大分子、大分子与小分子、大分子与金属离子等相互作用所引起的大分子构象变化，以及这种变化发生的程度和部位等重要问题，都有可能通过时间分辨荧光技术进行上也获得了越来越广泛的应用。生物芯片技术的一个重要内容，就是利用芯片上荧光标记物与待测液中底物的特异性作用，实现对待测物的高效检测。

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