抗坏血酸(Ⅰ)为一种未饱和糖酸的内酯,内中有两个烯醇基团产生酸性,即使用微弱的氧化剂,也能使其轉化成为脫氫抗坏血酸(Ⅱ)。脫氫抗坏血酸,实际上已不是一种酸,仅是一个中性的内酯。它可被还原再轉化成抗坏血酸:
較强的氧化剂能使(Ⅰ)或(Ⅱ)起剧烈的氧化。所以抗坏血酸为一活泼的还原剂,可用多种以可溶或不溶的无机与有机参加物的氧化还原反应为根据的显色試驗法来作出檢定。
使二氧化锰还原的試驗法
抗坏血酸会使二氧化锰还原成亚锰盐。MnO2浸渗的試紙,可用高锰酸鉀溶液处理滤紙来制得,这里有部分纤维素会被氧化,极細的MnO2沉淀于紙上,試紙的颜色从棕色到几乎白色,视MnO2含量而定。較大量的抗坏血酸可直接由白色斑点显示出来,白色斑点是由于将試液一滴放在棕色試紙上的結果。实际上无色的試剂紙应用于微量抗环血酸。在这种情况下,将滴試过的試紙浴浸于联苯胺溶液中,这时联苯胺和痕量的MnO2将形成联苯胺蓝,这就可使MnO2的除去,成为肉眼可見。因此,試紙的全部表面,除曾被抗坏血酸还原的那些斑点外,都变成蓝色。
操作手续 取待試物的醋酸溶液或中性的、碱性的溶液一滴,置于試剂紙上。1~2分钟后,将試剂紙浴浸于联苯胺溶液中。蓝色的紙上,如有白色的斑点,即示明有抗坏血酸存在。
试剂:1)二氧化锰試板,将0.2N KMnO4 1毫升,稀释至1000毫升。将紙浸漬在这溶液内15分钟。沥干后,置于热空气流中干燥之。
2)盐酸联苯胺的飽和溶液,恰在使用前,用同体积的水稀释。
鉴定限度:0.03微克 抗坏血酸(在0.004毫升中)
其它弱酸性溶液中的还原性化合物对粉細的二氧化猛也有同样效应,都能使它变成亚锰盐,檸檬酸即其一例。在有檸檬酸存在之下(例如果汁)来檢定抗坏血酸,可将試液預先用过量碳酸鈣摇蕩。然后取其悬浮液一滴,施加于試剂紙上。这个初步处理产生不溶性的檸檬酸鈣,因而可以完全避免MnO2試紙被檸檬酸还原,不过对抗坏血酸有輕微的影响。
使磷钼酸銨还原的試驗法
水溶性磷钼酸H3PO4·12MoO3·水中的络合結合的MoO3分子,比正钼酸根离子内的六价钼易被还原得多。因此,某些还原剂在酸性溶液中对MoO4-2离子不起作用,但当能产生黄色絡合磷钼酸根离子的PO4-3存在时,却立即发生反应。在这个場合中,由于产生胶态分散的氧化低价钼(“钼藍”),使溶液轉成蓝色。由于即使痕量的钼蓝也可辨认,因之磷钼酸是一种檢定还原性化合物的优良試剂。絡合結合钼提高了的被还原性,被保留在不溶的黄色磷钼酸銨中,只有遇到强还原剂,才显示其应有的作用。因此,抗坏血酸对于(NH4)3PO4·12MnO3的作用,可由其滴入曾經此盐浸渗过的試紙来作出檢定。当然抗坏血酸也能使水溶磷钼酸还原。
操作手续 待試物的酸性、中性或碱性溶液一滴放在试剂紙上。按照抗坏血酸的量,立即或在数分钟后将有蓝色或绿色的斑点,出現于黄色試紙上。
试剂:磷钼酸铵試紙。滤紙沉沒在磷钼酸的饱和酒精溶液中,让其瀝尽,并在冷空气流中干燥;然后再行浴浸于含有硝酸数滴的硝酸铵浓溶液中。試紙用水洗净后,在热吹風中干燥之。这試纸可在暗处保持数日。黄色的試剂紙。久放及暴露于日光,将会被纤维素还原变成蓝色。
鉴定限度:0.1微克 抗杯血酸(在0.01毫升中)
柠檬酸在以上規定的条件下不起反应;这就可能在有多至1000倍的柠檬酸存在下来检定抗坏血酸。
尿酸及尿酸盐也易与磷钼酸銨发生反应,可是无机酸会阻碍这个还原效应。因此,尿中的抗坏血酸,在試祥事先用濃盐酸数滴处理后,即可作出检定。