失去氨的试验法
胍在干热之下产生双胍和氨:
含有上列基团的胍盐或其衍生物的盐,在加热至約250°时,也会同样地热解分裂出氨。双胍或胍的环状衍生物加热时是不会分裂出氨的。含有自由NH2基团的胍盐失去了氨,将与反应(1)相似,都是涉及縮合作用的:
式(2)中放出的氨,在气相中可用奈斯勒氏試剂进行检定。
从这些化合物的水溶盐酸盐中分裂出氨,是有选择性的。伯、仲、叔胺类的盐加热到250°时,不会有氨放出。氨基酸的盐类,除了屬于胍衍生物的精氨酸盐外,都有同样情况。胍基醋酸和甲替胍基醋酸加热时不产生氨,因它們会失水而形成内酰胺;醋酸内酰胍和肌酸酐系胍的环状衍生物,沒有可以縮合的自由NH2-基,其情况也是一样。
遇到含有自由NH2-基的脲、硫脲、縮二脲及其它脲衍生物存在时,即不能应用这个試驗,因这些化合物加热到250°时也会产生氨。
操作手续 在微量試管中,放入固体試样少許或用其盐酸溶液一滴在管中蒸发。再在甘油浴180°中加热約10分钟,以除去全部的水份。管口差以曾用一滴奈斯勒氏試剂润湿过的滤纸一小片,然后仍在甘油浴中将试管的温度升至250°。立刻或数分钟内,如有棕色或黄色斑点出現,即显示有氨放出。
这个操作手续可检出:
2微克 碳酸胍(盐酸盐) | 5微克 精氨酸盐酸盐 |
5微克 盐酸硝基胍 | 100微克 链霉素硫酸盐 |
1微克 脒基脲 | 0.3微克 双氰胺 |
链霉素、鏈霉定(链霉胍)、合成灵(癸撑二胍化盐酸),也会給出正反应。值得注意的是,干燥的胍及其一些衍生物加热时会分裂出(CN)2。
用双乙酰的试验法
許多含HN=CくNH2/Nく基团的胍基化合物如和双乙酰及碱金属氫氧化物或石灰温热时,会产生橙色。这个显色反应是母体胍所不能发生的。活性的物质不是双乙酰的本身,而是由碱的作用所产生一个不稳定的醛醇。也許是由于这个产物和各别胍基化合物的自由-NH2基的縮合。这一假設得到了肌酸(Ⅰ)和肌酸酐(Ⅱ)性行的支持:
仅式(Ⅰ)含有一个自由-NH2基,在和双乙酰与苛性碱温热时产生红-橙色,而内酰胺(Ⅱ)就不如此。
胍基化合物中-NH2基的反应活性取决于分子的其余部分。甲胍、硝基胍与氨基胍和双乙酰及碱金屬氢氧化物温热,都不产生紅色①。这个显色反应虽不是一切胍基化合物都会发生,但胍基衍生物检验中的正反应,却具有高度的特征价値。
操作手续 在微量試管中,放入0.1%双乙酰水溶液一滴,接着放入試液一滴,然后再加入氧化钙一小撮(刮勺尖大小)。試管浸入沸水浴中。如有胍基衍生物存在,石灰会先染上红色,然后整个溶液都发展成这色。
这个操作手续可检出:
下列各物給出正反应:链霉素、对-氯苯胺双胍、脒基硫脲、苯替双胍。
下列各物观察不到反应:磺胺胍、均二苯胍(蜜苯胺)蜜胺(2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪)、盐酸鳥嘌呤、肌酸酐、苯酰缩胍胺、乙酰縮胍胺(2,4-二氨基-6-甲基-1,3,5-三嗪)、胍盐类。
① 反应性的缺乏,显然可以得到一个事实证明,即活性醛醇转变成不活泼二甲基苯醌的速度,远超过于醛醇和这些胍基化合物中-NH2基的缩合速度。