硒能形成硒化物（Se（Ⅱ））、亚硒酸盐（Se（Ⅳ））和硒酸盐（Se（Ⅵ））等不同类型化合物，其中以四价硒化合物最为稳定．二氧化硒溶于水后成为亚硒酸，在强氧化剂的作用下Se（Ⅳ）可被氧化为Se（Ⅵ）；相反，比较普通的还原剂便能将Se（Ⅵ）还原为Se（Ⅳ）甚至元素态．光度测定硒最常用的方法是3，3'－二氨基联苯胺法和2，3－二氨基萘法．其特点不仅灵敏度高，而且选择性好．

       3，3'－二氨基联苯胺法
       在酸性介质中，Se（Ⅳ）与3，3'－二氨基联苯胺形成黄色难溶于水的螯合物，这是比色测定硒的十分灵敏的方法之一．反应可用下式表示：

反应产物在甲苯溶液中有两个吸收峰，分别位于340和420毫微米处，通常选择在420高微米处来比色测定硒，其吸收光谱曲线如图Ⅷ－30，在420毫微米处，其摩尔吸收系数等于1．02×10⁴．应用该方法来比色测定硒时选择性很好，碲并不干扰硒的测定，钒（Ⅴ）和铁（Ⅲ）由于能氧化试剂形成呈色化合物，通常便应用氟化物或磷酸盐来掩蔽铁．该方法曾用来测定各种金属及其合金、硅酸盐、土壤、植物与生物材料、有机物、水、空气及硫酸等对象中的硒含量．

       测定步骤：取含硒量不大于200微克的分析试液近30毫升，加2毫升甲酸，5毫升二氨基联苯胺溶液并使溶液酸度达到pH2．0－2．5．溶液放置30分钟，然后用氨水中和至pH6－7，以甲苯萃取1至2次，每次萃取1分钟，井尽量避免形成乳浊液，萃取液移入50毫升容量瓶中以甲苯稀至刻度，摇匀后在420毫微米处（或用蓝色滤光片）进行光度测定．以水或空白溶液（在少量硒时）作对照．
    注意事项：

    倘有Al、Bi、Cu、Ni等金属离子存在时应加入EDTA掩蔽．有Fe（Ⅲ）存在则加0．05－0．5克氟化钠掩蔽，其量视铁的多少而定．
       二氨基萘法
       2，3－二氨基萘在中性或酸性溶液中与Se（Ⅳ）反应形成有色化合物．用甲苯萃取其最大吸收在337毫微米，摩尔吸收系数等于2．38×10⁴．该试剂的优点在于它在水溶液中相当稳定，几乎不被空气中氧和其他氧化剂所氧化．在EDTA、氟化物和草酸盐存在下测定硒时，仅大量的铜和氧化剂有干扰．反应的适宜pH为1．5－2．5．

       试剂和溶液：
       1．2，3－二氨基萘  0．1％的0．1N 盐酸溶液；2．EDTA  0．1M 水溶液；3．NaF  0．1M水溶液；4．草酸钠  0．1M水溶液．

       测定步骤：
       取含Se（Ⅳ）的酸性或中性试液，加入5毫升EDTA、1毫升NaF和1毫升草酸钠溶液，并调节溶液至pH2．0，再加入5毫升2，3－二氨基萘，放置2小时至显色完全．混合液移于100毫升分液漏斗中，以少量水洗涤．准确加入5毫升甲苯，萃取1分钟，将有机相于377毫微米测量吸光度．