在分析化学中重现性这一概念的意思表示多次测得结果之间出现的重复性、相等性及分散程度.而准确度则表示测定结果与真值之间的相符合程度.
光度分析的重现性决定于样品含量范围以及光度测定技术等因素,一般来说,目视法的重现性约为5-10%,而光电比色法重现性较好,在最适条件下约在2一5%范围内.由于近代分光光度仅器的改进,如配合应用差示法则重现性可控制在0.2-0.5%范围内.这样便有可能应用光度分析方法来测定常量组分.在这一概念中,重现性直接表达了测定误差的好坏,在分光光度计上当吸光度A<0.1或A>1.0时测定误差很大,当A=0.4343(透光率T=37%)附近时误差最小.如图Ⅷ-1所示,当A=0.2-0.8(T≌63-16%)范围内光度测定的误差较小,因此最合理的工作曲线的吸光度应选择在此范围之内.
准确度是误差的另一种描述,在光度测定中影响准确度的主要因素有化学因素和物理因素.化学因素中,pH值对显色反应影响很大.常常最适pH改变0.1单位可导致约5%的误差.误差也与体系中多组分的影响及被测溶液离子强度过大有关,一般认为10-3-10-4数量级微量分的光度测定误差约为±10%,而当含量低至10-6-10-7%且测定前需预先浓缩时则增至±30%左右.物理因素中最重要的是光的非单色性,严格地说,大多数有色体系在具滤色片的光电比色计上测定时并不精确遵照比尔定律,改用分光光度计则可改善这一现象,这从图Ⅷ-2很易看出.
上图表示同一有色物质浓度不同的两种溶液:极稀溶液B和稀溶液C的吸收曲线及透过滤色片的吸光度,对曲线B来说1-2-2'-1'部分完全处于光照范围内,而浓度较大的吸收曲线C的1-3-3'-1'部分则有2-3-4和4'-3'-2'两段未落在光照射范围内,吸光度则低于应有值,即吸光度的增长低于有色物浓度的增加,造成测定的误差.