高效液相色谱的应用
实验室k / 2019-08-02
HPLC在医药方面的应用是普遍而有效的,例如药物及其代谢产物的分析,包括生物胺、甾体激素、抗生素、各种甙类等化合物的分离分析和测定,当然,它对中草药有效成分的分离分析也同样是常用的工具。
1.强心甙的分离分析 从植物或中草药中提取强心甙,所得的产物常是复杂的混合物,甚至已纯化的产品也还含有微量的类似物,只有高效的分离方法才能达到分析目的。F.Erni等用反相分配色谱分离毛地黄强心甙是一个很好的实例,图16-7。
强心甙注射液可直接进样分析,若是片剂经磨碎后用移动相溶剂提取后也可直接分析。
柱:10μ—C18,30cm×3.5mm I.D.;流动相:37%乙腈/水;流量:1.4ml/min;检出:UV,220nm。
2.鱼藤酮类化合物的分离 鱼藤酮对人毒性小,可作为除虫剂,但近来发现它有致癌作用,因此需进行纯度分析。图16-8为鱼藤酮的HPLC图谱。
柱:ODS(6~10μm),25cm×2.1mm I.D.;流动相:甲醇:水:磷酸(60:39.9:0.1)→(梯度)甲醇:水:磷酸(85:14.9:0.1),1%/min;流量:0.8ml/min;检出:UV,254nm。
3.脂质和脂肪酸类化合物的分离 脂质成分包含非常广的极性范围,需用梯度洗脱才能分离,故示差折光检测器不能使用。它们在UV-254nm波长又无吸收。只可通过衍生物的制备来达到分离检测。
Borch将脂肪酸进行苯乙醇酯化,可用UV-检测器进行检测。图16-9为九个脂肪酸经酯化后的分离情况。
柱:Zorbax ODS,25cm×2.1mm I.D.;流动相水:甲醇(40/60→直线梯度,1%/min);压力:100kg/cm2(9.80665×10(6次方)Pa);检出:UV,220nm。