薄层色谱法的展开方式
实验室k / 2019-07-29
一般常用的展开方式有上行法、下降法、水平展开及径向展开等。
典型的上行展开,是薄层展开中广泛使用的一种方式。当不能取得满意结果时,可考虑其他方式。
下降展开如图14-29所示。该法在纸色谱中应用较多,而在薄层色谱中很少采用,因连续展开更易改善分离。
水平展开也称平卧展开,它适宜于一些硫松薄层(软板)的展开。有下列几种设计:
(1)圆形技术:通过一点供应溶剂,产生环状区带,也称径向展开或圆盘色谱。其简易设计如图14-30。
A操作可分离几个混合物样品,它用一块面向下涂有薄层之玻璃板直接架在圆盘上。该国盘有适当横截面,内含溶剂,棉制灯芯联接薄层和溶剂,欲分离的混合物上样在孔眼周围的1cm内,从面可在同一块薄层板上比较一系列物质。
在具有预分离柱的B操作中,薄层面向上,溶剂经由棉制填料通过预分离柱到达薄层。这类操作的上样量可以大些,样品预先上样在预分离柱下端。展开时,必须盖住薄层以防止溶剂蒸发过快,为此,需要一块边上粘有5mm宽、3mm厚的边条和没有孔眼的20×20cm2的玻璃盖板,见图14-30中的(1)。
(2)离心技术:通过一点供应溶剂,并经过离心力的作用而很快地移向外部,溶剂通过旋转轴处导入。薄层板在一块平面板中旋转。这种展开方式加速了分离速度,例如在直径20cm的圆形薄层板上,以500~700转/min的速度,在10min内可分离染料混合物。若按常规方法,则需35min完成分离。
(3)从一端供应溶剂的平卧技术:如图14-31所示,在一只浅玻璃展开碟或操作盘中注入溶剂,一根玻璃条或棒(直径2cm)周围包着几层已为溶剂润混的滤纸,使溶剂能经由它转移到薄层。另外一根玻璃棒作为薄层板的第二个支持物。这类设计能保持良好的饱和状态。