分光光度测定的新技术导数分光光度法
实验室k / 2019-07-23
导数分光光度法是对吸收曲线进行简单的微分处理，即可得到吸光度对波长的变化率曲线(dA/dλ-λ)，这一曲线称之为导数吸收光谱。
对吸收曲线进行微分处理，实质上即是测定在整个区域内这一曲线的斜率。吸收曲线上的最大吸收对应于偶数阶导数光谱的极值(即最大值或最小值)，而在奇数阶导数光谱中则对应于零(图12-26)。由图12-26可知，随着导数阶数的增加，吸收带宽变窄，峰形变锐，从而提高了光谱的分辨率。
应用导数分光光度法对于分析混浊试样；微量成分的检测；样品纯度的检验；背景扣除及多组分混合物重叠光谱的分离与测定等方面，均具有特殊的作用。
导数光谱可利用双波长分光光度计测得，但这并非唯一获得试样导数光谱的方法，随着电子技术的发展，尤其是计算机在仪器上的应用，使得有可能对信号进行模拟微分，因此，一般用电学方法也可得到导数吸收光谱，并且能得到较高阶的导数收光谱。
在定性方面，一般的吸收光谱上的肩峰或二个相互重叠的吸收峰，很难加以区分，这给光谱解析带来了困难，若利用导数吸收光谱，则能很简便地将肩峰以及相互重叠的吸收峰区别开来(图12-27)。
导数分光光度法在定量分析方面的应用，尤其是对混合物的定量，有其独特的优越性。在一定条件下(特定波长)，导数值dA/dλ与被测组分的浓度呈线性关系，可采用下述二法求得组分的含量(图12-28)。
(1)切线法：将吸收曲线经数学处理变成导数吸收光谱后，在二相邻峰的极大值处作一切线(ab)，然后取中间极值作一平行于纵坐标的直线(t)，根据测量其大小计算组分的含量。
(2)峰-谷法：对于多组分混合物中某一成分分析，常在导数光谱图上测量峰顶与峰谷两极值之间的距离(P)，从而求得其含量。
例如，乙醇中微量苯的测定：利用一般分光光度法只能检测乙醇中的苯约50ppm左右，当苯的含量降低到10ppm时，苯的特征吸收峰已很小，无法测量(图12-29)，但用导数分光光度法则可很轻易地检测到，若用二阶导数光谱，可检测到乙醇中5ppm的苯，而用四阶导数光谱甚至可检测到1ppm，从而大大提高了灵敏度。
.jpg "吸收光谱曲线及其第1阶到第4阶导数曲线(示意图)")
.jpg "两个吸收峰重叠及其第1阶到第4阶导数曲线(示意图)")
.jpg "导数光谱的定量计算")
.jpg "乙醇中微量苯的定量分析")
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