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吸收光谱的定性分析方法


实验室k / 2019-07-15

       在可见光区和紫外线区以吸收光谱做定性或定量时,主要根据不同物质在光谱上具有一些特征性吸收来进行测定的。这些特征有最大吸收波长、肩峰、吸光系数和吸收度比值等,这些数据被称为某物质的特征性(物理)常数。测定样品所得的特征性常数值与标准品的特征性常数值进行严格对照,根据二者的一致性,可做为初步定性分析。要测得这些数据需要较精密准确的仪器。从仪器的精度及其所适应吸收光谱的波长范围等方面来看,581-G型光电比色计、72型及721型分光光度计均不适于对物质做定性分折用。751型分光光度计使用波长范围广、精度高,可以用来对物质进行定性分析测定。特别是利用751分光光度计对物质的最大吸收波长λ最大和吸光系数ελ及E1cm1%·λ等特征常数的测定,常做为定性分析的依据。

       分析方法如下:
       1.对照光谱曲线的一致性进行初步定性分析    如果样品与标准品是同一种化合物的话,它们的吸收光谱曲线也必然完全一致。使被测样品与标准品两溶液在条件完全相同条件下,分别测定它们的吸收光谱曲线,比较对照二者是否一致。如无标准品时,可参考标准图谱,并与之比较,二者吸收光谱曲线一致时,可初步定性是同一物质。吸收光谱曲线的做法是以波长为横坐标,以吸收度A或吸光系数ελ或lgελ为纵坐标作图。如以资料中的光谱曲线做标准对照时,样品液也必须按照标准图谱条件规定的要求去做,测得结果再与标准图谱对照定性。
       例如,根据测定,绘制合成维生素A2(实线)与天然维生素A2(虚线)的紫外吸收光谱曲线图(图13-20)。它们所用溶剂与所配浓度都相同,二者的紫外吸收光谱图完全一致,说明合成的维生素A2和天然品是相当的。

       为了进一步确证,有时可改換一种溶剂,分别再测定吸收光谱曲线进行比较。还可采取改换其它条件,使标准品与样品在新条件下进行测定并绘图比较,如果二者光谱图仍相一致,即可做进一步定性确证。
       2.对照比较“吸收度比值或吸光系数比值”进行定性分析    有的物质其光谱中吸收峰较多,可以将几个吸收峰处的吸收度A的比值或吸光系数的比值做为定性依据。因对该物质来说,其各自峰值的最大吸收波长λ最大是一定的,那么它们的吸收度比值或吸光系数的比值也必然是一定的,并为其特征性之一。例如维生素B12的吸收光谱图上有三个吸收峰,分别是278、361及550nm,它们的吸光系数E1cm1%λ或吸收度A的比值为:

       如某被鉴定样品,测得吸收峰的数目和峰值波长与以上278、361及550nm近似,且它们的吸光系数比值(或吸收度A的比值)都在所定的范围之内,则可考虑样品结构基本与标准维生素B12相同。

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