用硫酸和棓酸的試驗法
酒石酸鈣和含少許棓酸的硫酸一起加热时,产生蓝色;如果仅有小量酒石酸鈣存在,却为蓝-绿到黄-绿色。濃硫酸会分裂酒石酸(Ⅰ)而产生乙醇醛(Ⅱ):
这个醛然后和棓酸C6H2(OH)3COOH形成有色的縮合产物,浓硫酸的作用,可能为脫水剂和氧化剂。
在同样的情况下,乙醇酸、丙醇二酸、甘油酸及乙醛酸、以及甲醛与碳水化合物也都产生有色产物。草酸、柠檬酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、肉桂酸、水楊酸及诸脂肪酸都不显色。
操作手续 本试验法仅用很小量的钙沉淀。应先予过滤、洗涤,并在硬化滤纸上干燥之(防止纤维素纤维的干扰,因纤维素也有反应),然后移入试管,用0.01%棓酸的浓硫酸溶液1毫升处理,并在自由火焰上加热至120~150°。如果仅能获得极小量的钙沉淀,最好是用2N硫酸将它溶入过滤器上,而取其遗液一滴用于试验。
下列的颜色系由各种不同分量的酒石酸得到的:
100微克 蓝色 | 10微克 蓝-绿色 | 5微克 带蓝绿色 | 2微克 黄绿色 |
用β,β'-联萘酚和硫酸的试验法
酒石酸如和含β,β'-联萘酚的浓硫酸一起加热,就有绿色螢光出现。
下列各酸和这試剂不起显色反应:乳酸、苹果酸、α-羟基丁酸、β-羟基丁酸、赤酮酸、丙酮酸、乙酰丙酸,草酸、糖质酸、柠檬酸、水杨酸、间-羟基苯酸、对-羟基苯酸、原儿茶酸、棓酸、α-,β-,及γ-間-二羟基苯酸、焦棓酚羧酸、奎尼酸及肉桂酸;甲醛及碳水化合物也无反应。
下列各酸产生不同的颜色:乙醇酸及乙醛酸(紅-棕色到棕色),甘油酸及中草酸(灰色),葡糖酸,葡糖醛酸,二羟基酒石酸、丙醇二酸及苹果酸(绿色)。
操作手续 取固体试样或其溶液一滴,用固体β,β'-联萘酚少许或0.05%联萘酚的浓硫酸溶液数毫升处理,并放85℃水浴中保持半小时。如有酒石酸存在,将有光度强弱不等的绿色萤光,在加热时逐渐出现,而在冷却时加深。試剂本身的紫色萤光则逐渐消失。
如用试液一滴和试剂溶液1~2毫升一起加热20至30分钟,即少至10微克的酒石酸,也可检定出来;0.05克的酒石酸,在有任何多少量的草酸或琥珀酸及1000倍于其量的柠檬酸或150倍于其量的肉桂酸,或10倍于其量的苹果酸存在下,都可被检定出来。
鉴定限度:10微克 酒石酸