福林酚
中文名称:福林酚英文名称:Folin reagent别称:福林试剂规格 100ML化学特性福林酚是多种化合物配制成的混合物,一种能与酚羟基呈色的磷钼酸-磷钨酸试剂。可与蛋白质分子中酪氨酸残基作用生成深蓝色化合物。在劳里法蛋白质定量中也使用该试剂。无色至淡黄色液体,试剂中的 W6+ 在碱性条件下,与体系中存在的酚羟基发生反应,得到呈现蓝色的W5+。福林酚(Lowry)法系依据蛋白质分子中含有的肽键在碱性溶液中与Cu2+螯合形成蛋白质-铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中的酪氨酸、酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。该法灵敏度高,测定范围通常可达20~250μg。其中福林试剂是该检测方法中最关键的试剂。福林试剂的制备在中国药典2015年版四部中有收载,目前也有市售产品。实验室自制福林试剂步骤繁琐,过程复杂,制备所得的试剂质量无法保证。而福林试剂的其中福林试剂是该检测方法中最关键的试剂。而福林试剂的市售品较容易获得。蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸,在碱性条件下,可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色(生成钼蓝和钨蓝化合物)。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比, 可用比色法测定。蛋白酶活力测定一般采用酪蛋白(干酪素,酪素)为底物,在一定的水解条件下生成氨基酸,其活力用生成酪氨酸的量表示,而酪氨酸量采用福林—酚试剂法测定.福林—酚试剂系磷钼酸盐与磷钨酸盐的杂多酸溶液,在碱性条件下易被酪氨酸中酚基还原,生成钼兰与钨兰,用比色法测定. 本文对酶的浸取,水解条件及比色条件进行了试验,目的是进一步了解蛋白酶活力测定中影响因素,使方法的重复性更好,准确度更高.
产品用途福林酚用作化验分析,蛋白质含量的测定,蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)与福林酚反应,生成深蓝色复合物,蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。适用于对体系中存在酚羟基化合物其含量的比色法、分光光度法。
测定方法将1ml标准蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸缓冲液加入试管中,在40℃保温10min,迅速加入1ml酶液,保温15min后加入3ml10%的三氯乙酸中止反应。取滤液1ml加入0.55M的碳酸钠溶液5ml和福林试剂0.5ml,40℃水浴10min显色,在OD680处比色。
生产方法向2000mL的磨口回流瓶中加入100g钨酸钠(Na2WO2·2H2O)、25g钼酸钠及700mL的去离子水,再加入50mL85%的磷酸及浓盐酸l00mL,充分混合后,接上回流冷凝管,以小火回流10h,结束后再加入50g的硫酸锂(Li2SO4)、50mL去离子水及数滴液溴,再继续沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后滤液呈黄绿色(如仍呈绿色,需再重复滴加溴水的步骤),加去离子水定容至1000mL,过滤,滤液置于棕色试剂瓶中,贮于冰箱中可长期保存备用。此溶液使用时可按1:3比例用去离子水稀释。
产品信息 [颜色] 无色液体 [重量] 500ml